WesternBright ECL經(jīng)過(guò)特殊配方，可為敏感膠片成像提供強(qiáng)大信號(hào)。WesternBright ECL底物在與HRP反應(yīng)后產(chǎn)生強(qiáng)烈，持久的信號(hào)。使用WesternBright ECL或Amersham TM ECL TM（GE Healthcare）檢測(cè)含有連續(xù)稀釋的轉(zhuǎn)鐵蛋白蛋白的重復(fù)狹縫印跡。將兩個(gè)印跡同時(shí)暴露于同一片薄膜15秒。WesternBright ECL比Amersham ECL靈敏幾倍。

當(dāng)檢測(cè)低豐度蛋白質(zhì)時(shí)，WesternBright ECL的更高靈敏度尤為重要。用連續(xù)稀釋的HeLa細(xì)胞裂解物的重復(fù)Western印跡探測(cè)ERK1并使用WesternBright ECL或Amersham ECL HRP底物檢測(cè)。將每個(gè)印跡暴露于膜1分鐘。

用顯示的抗體稀釋液探測(cè)含有連續(xù)稀釋的轉(zhuǎn)鐵蛋白的重復(fù)狹縫印跡，并根據(jù)制造商的說(shuō)明用Westernbright ECL或Pierce ECL（Thermo Scientific）檢測(cè)。將印跡同時(shí)成像在同一片膠片上。WesternBright ECL產(chǎn)生相同的靈敏度，初級(jí)數(shù)減少10倍，次級(jí)抗體減少5倍。

WesternBright ECL產(chǎn)生持久的信號(hào)。用WesternBright ECL檢測(cè)的印跡可在底物孵育后6小時(shí)成像。沒(méi)有必要趕到暗室去拍攝污點(diǎn)。

WesternBright ECL的更高穩(wěn)定性允許在長(zhǎng)時(shí)間暴露期間積累更多信號(hào)，從而增加檢測(cè)極低豐度蛋白質(zhì)的能力。檢測(cè)重復(fù)的Western印跡的ATP1A1蛋白，并使用WesternBright ECL或Amersham ECL檢測(cè)。在10分鐘的曝光中，任何一種基質(zhì)都只能檢測(cè)到2個(gè)條帶。暴露60分鐘后，在WesternBright ECL印跡的1.25μg泳道中可以看到一條帶，而信號(hào)衰減導(dǎo)致Amersham ECL印跡暴露10分鐘或60分鐘之間幾乎沒(méi)有差異。

WesternBright ECL產(chǎn)生強(qiáng)烈的信號(hào)，從而在更短的曝光時(shí)間內(nèi)獲得更高的靈敏度。根據(jù)制造商的說(shuō)明，使用WesternBright ECL或Amersham ECL檢測(cè)含有連續(xù)稀釋的轉(zhuǎn)鐵蛋白蛋白的重復(fù)印跡，并將印跡暴露于同一片膠片。與使用Amersham ECL印跡5分鐘曝光相比，WesternBright ECL印跡暴露30秒可以檢測(cè)到更多條帶。