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更新時間:2022-02-09點擊次數:1512

advancedbiomatrix 5010說明書

Nutragen® _

I 型膠原蛋白溶液,6 mg/ml(牛)

目錄 #5010

Nutragen ®是一種 6 mg/ml 的 I 型牛去端膠原溶液,用于 2D 和 3D 細胞培養。由于濃度較高,Nutragen ®水凝膠將比其他濃度較低的膠原蛋白產品更強。

產品描述


Nutragen ® 膠原蛋白被稱為所有膠原蛋白的純度標準(> 99% 的膠原蛋白含量)、功能性和最天然的膠原蛋白。Nutragen ®  是從來自美國受控的封閉畜群的牛皮中分離出來的。Advanced BioMatrix 的制造工藝符合嚴格的質量標準,這些標準已被證明可以產生批次間一致性。

Nutragen ® 膠原蛋白約 97% 為 I 型膠原蛋白,其余由 III 型膠原蛋白組成。Nutragen ® 膠原蛋白以大約 6 mg/mL 的濃度提供,以提供極其堅固的凝膠。每個特定批次的濃度都在分析證書上提供,該證書可在購買每種產品時獲得。Nutragen ® 可溶于 0.01 N HCl 中的去端膠原蛋白,因此其 pH 值約為 2.0。

Nutragen ® 膠原蛋白非常適合用于表面涂層,為培養細胞提供薄層制備,或用作固體凝膠。Nutragen ®  膠原蛋白以 50 毫升的體積提供,并包含在用戶友好的包裝中,以便使用和儲存。Nutragen ®  經過無菌過濾,并以即用型溶液的形式提供。

參數、測試和方法Nutragen ®  I 型膠原蛋白 #5010
滅菌方法過濾
提取方法酶 - 去端膠原
形式解決方案
包裝尺寸50 毫升、1000 毫升
貯存溫度2-10°C
保質期自收到之日起至少 6 個月

膠原蛋白濃度 - 雙縮脲

5.8-6.8 毫克/毫升

膠原蛋白純度 - 銀染

> 99%
酸堿度1.9-2.1
動力學凝膠測試(分鐘)< 40
凝膠形成管測試(分鐘)< 40

原纖維生成(吸光度單位)

> 0.5

電泳圖案 - 考馬斯藍

特征
無菌 - USP 修改沒有增長
內毒素 - 鱟< 1.0 歐盟/毫升
滲透壓 (mOsmo H2O/kg)< 35
細胞附著試驗經過
來源牛皮
水凝膠楊氏模量 E (Pa)特征

涂裝程序

注意:使用這些建議作為指導來確定適合您的培養系統的最佳包被條件。

  1. 從瓶子中取出所需數量的膠原蛋白并分配到稀釋容器中。

  2. 將 Nutragen ® 在水中稀釋至 ~50 至 100 µg/ml (~1:30)。也可以使用 0.01 N HCl 溶液。

  3. 輕輕旋轉內容物,直到材料*混合。

  4. 將適量稀釋的 Nutragen ® 材料添加到培養表面,確保整個表面都被包被。

  5. 在室溫下孵育,蓋上蓋子 1-2 小時。吸出任何剩余的材料。或者,在室溫下孵育直至表面干燥。

  6. 孵化后,吸出任何剩余的材料。

  7. 用無菌培養基或 PBS 仔細沖洗涂層表面,避免刮傷表面。

  8. 涂層表面已準備好使用。如果保持無菌狀態,它們也可以在 2-8°C 潮濕或風干的條件下儲存。

3-D 凝膠制備程序

  1. 將 1 份冷凍的 10X PBS 或 10X 培養基緩慢加入 8 份冷凍膠原蛋白溶液中,輕輕旋轉。

  2. 將混合物的 pH 值調節至 7.0–7.5。建議使用無菌 0.1 M NaOH。仔細監測 pH 調節(pH 計、酚紅或 pH 試紙)。 

  3. 用無菌水將最終體積調整為總共 10 份。

  4. 為防止凝膠化,將混合物的溫度保持在 2-10°C。

  5. 要形成凝膠,請加熱至 37° C。為獲得最佳效果,凝膠形成需要大約 40 分鐘。


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