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Haematologic HCXI-0150說明書

發布時間:2018/10/15點擊次數:549

Haematologic HCXI-0150說明書

HTI HCXI-0150

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業從事體外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質,以及骨代謝的調節。HTI產品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質,包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務包括定制蛋白質純化,蛋白質修飾,化驗開發,合同制造和合同研究。

 

Haematologic HCXI-0150說明書

Human Coagulation Factor XI

人凝血因子XI

HCXI-0150 Human Factor XI

 

 

因子XI
的結構域結構表示因子XI單體的結構域結構。鑒定為R1至R4的區域對應于四個串聯氨基酸序列重復,其終包含因子XIa的重鏈。在因子XIIa的蛋白水解活化期間,包含因子XIa的輕鏈的“催化結構域”從重鏈區域切割下來。因子XIa的重鏈和輕鏈通過二硫鍵保持相關。成熟因子XI分子是由兩個明顯相同的單體組成的同型二聚體,其通過二硫鍵保持締合。

 

  •  

HCXI-0150 人因XI 

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尺寸

50微克

公式

50%甘油/水(v / v)

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存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

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活動決定

凝血試驗

保質期(妥善保存)

12個月

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因子XI是血漿糖蛋白,其在與高分子量激肽原的非共價復合物中循環(1)。成熟分子在肝臟中合成,是雙鏈同源二聚體,分子量約為160,000(2,3)。據估計,總質量的5%可歸因于碳水化合物(2)。兩種相同的單體具有80,000的分子量,并通過二硫鍵連接在一起。因此,通過SDS-PAGE分析,因子XI表現為單一條帶,非還原(Mr = 160,000)和還原(Mr = 80,000)。

因子XI作為酶原循環并且需要蛋白水解活化以獲得絲氨酸蛋白酶活性。因子XI向因子XIa的轉化由因子XIIa催化,并導致每個單體(3)中Arg369-Ile370鍵的裂解。因子XIa由兩個NH2-末端衍生的重鏈和兩個COOH-末端衍生的輕鏈組成,所有這些輕鏈通過二硫鍵保持在一起。因子XIa通過催化因子IX向因子IXa的轉化而參與凝血的內在途徑。一種稱為血漿促凝血酶原激酶前因缺陷的出血性疾病是由缺乏因子XI促凝血活性引起的(4,5)。在因子XI缺陷患者中觀察到的可變的出血傾向與因子XI活性或抗原水平無關。

從歷*看,因子XI由于其相對較低的血漿濃度及其對蛋白水解的敏感性而難以純化(6)。因子XI從新鮮冷凍血漿中純化,其通過添加的抑制劑穩定。首先用BaCl 2處理血漿以除去維生素K依賴性蛋白質,然后通過親和層析分離因子XI。在肝素瓊脂糖凝膠上的終色譜步驟產生完整因子XI的均勻制備。成品以50%(vol / vol)甘油/ H2O供應,應儲存在-20oC。

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人因子XI,每泳道1μg

緩沖

MOPS

標準

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

特別說明

由于存在高達50%的β形式,重鏈是雙重鏈。α-Xa向β-Xa的轉化通過α-Xa對α-Xa的自動切割發生,導致COOH末端肽的喪失。

 

 

本土化

等離子體; 與高分子量激肽原相關

血漿濃度

2-7μg/ ml(2,3,7,8)

行動方式

酶原; 絲氨酸蛋白酶因子XIa的前體

分子量

160,000(人類)(2,3)

消光系數

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 13.4(人類)(2)

 

等電點

8.9-9.1

結構體

同二聚體由兩個明顯相同的亞基(Mr~80,000)組成,由二硫鍵連接在一起。單體含有四個串聯氨基酸重復序列,與血漿前激肽釋放酶具有同源性(9)。

碳水化合物百分比

5%(人)(2)

  1. Thompson,RE,et al。,J.Clin。Invest。,60,1376(1977)。
  2. Kurachi,K。和Davie,EW,Biochemistry,16,5831(1977)。
  3. Bouma,BN和Griffen,JH,J.Biol。Chem。,252,6432(1977)。
  4. Rosenthal,RL,et al。,Proc。SOC。進出口。生物學。Med。,82,171(1953)。
  5. Forbes,CD和Ratnoff,J.,J。Lab。臨床。Med。,79,113(1972)。
  6. Kurachi,K。和Davie,EV,Methods Enzymol。,80,211(1981)。
  7. Wuepper,KD,美聯儲。Proc。,31,624(1972)。
  8. Saito,H。和Goldsmith,G.,Blood,50,377(1977)。
  9. Fujikawa,K。等,Biochemistry,25,2417(1986)。

 

 

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