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HTI HCXII-0155說明書

發布時間:2018/10/15點擊次數:312

Haematologic HCXII-0155

HTI HCXII-0155說明書

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業從事體外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質,以及骨代謝的調節。HTI產品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質,包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務包括定制蛋白質純化,蛋白質修飾,化驗開發,合同制造和合同研究。

 

Haematologic HCXII-0155說明書

Human Factor XII

Human Coagulation Factor XII

人凝血因子XII

 

Human Factor XII  因子XII
的結構域表示基于序列同源性的因子XII結構域的組織,其中:EGF =表皮生長因子,I型和II型=與纖連蛋白中發現的結構域同源的結構域,實心箭頭=形成激肽釋放酶的切割位點α-和β-因子XIIa,虛線箭頭=裂解導致中間形式的因子XIIa。

HCXII-0155 人因XII 

尺寸

100微克

公式

50%甘油/ 4mM乙酸鈉,0.15M NaCl,pH 5.3(v / v)

 

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

 

活動決定

凝血試驗

保質期(妥善保存)

12個月

 

因子XII(XII)(Hageman因子)是單鏈(Mr = 78,000)糖蛋白酶原,其在血漿中以40μg/ ml(1-5)的濃度循環。激肽釋放酶對XII向活性絲氨酸蛋白酶因子XIIa(XIIa)的相互激活是引發內源性凝血途徑的關鍵。表面結合的α-XIIa依次激活因子XI至XIa。激肽釋放酶對α-XIIa的二次切割產生β-XIIa,其催化激肽釋放酶,因子VII和經典補體級聯的溶液相活化。

生理和非生理學的各種帶負電的物質促進XII活化并因此引發內在途徑的能力導致了pssentonym“接觸激活”。與陰離子表面結合會誘導構象變化,使XII酶原更容易被各種蛋白酶切割(6,7)。單獨與帶負電荷的表面結合不太可能足以激活XII,因為缺乏前激肽釋放酶和高分子量激肽原的XII和血漿的高度純化制劑不經歷這種“自催化”(8-11)。

激肽釋放酶在XII的R353-Val354處的單次切割產生α-XIIa,即通過二硫鍵保持在一起的2鏈蛋白酶(Mr = 80,000)。COOH末端輕鏈(Mr = 28,000)含有催化三聯體(His-40,Asp-89,Ser-191),而NH2-末端重鏈(Mr = 52,000)含有分子的陰離子表面結合部分。 。二硫鍵外的激肽釋放酶對α-XIIa的二次切割產生β-XIIa(XIIf,BHFa,HFf,hageman因子片段)(Mr = 28,000),其不再結合陰離子表面(12)。β-XIIa可以激活前激肽釋放酶,但幾乎沒有促凝血活性(13,14)。XIIa的其他幾種次要中間形式如上圖所示。

XIIa的抑制劑包括C1-INH,α2-抗纖溶酶,α2-巨球蛋白和抗凝血酶III。在生理濃度下,這些抑制劑的相對有效性分別為91:4.5:3:1.5(10,16-19)。C1-INH與XII的比例與因子VII的“冷激活”和血漿儲存時腎素對腎素的轉化有關(20,21)。

通過免疫親和層析從新鮮冷凍血漿制備人因子XII,并在50%甘油/ 4mM乙酸鈉,0.15M NaCl,pH 5.3中提供,在-20℃下儲存。

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人因子XII,每泳道1μg

緩沖

MOPS

標準

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

特別說明

由于存在高達50%的β形式,重鏈是雙重鏈。α-Xa向β-Xa的轉化通過α-Xa對α-Xa的自動切割發生,導致COOH末端肽的喪失。

 

 

本土化

等離子體

血漿濃度

40μg/ ml(3)

行動方式

酶原; 絲氨酸蛋白酶XIIa的前體; 由激肽釋放酶/ HMWK /陰離子表面復合物激活以引發內在途徑

分子量

80,000(2)

消光系數

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 14.0

 

等電點

6.8

結構體

單鏈(mr = 80,000),基于序列同源性組織成6個結構域(5)。

碳水化合物百分比

17%

 

  1. Schmaier,AH,et al。,Hemostasis and Thrombosis,ed。RW Colman,J。Hirsh,VJ Marder和EW Salzman,pp 18-38,JB Lippincott Company,Philadelphia,1987。
  2. Griffin,JH和Cochrane,CG,Methods Enzymol。,45,56-65(1976)。
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  21. Radcliffe,R.,et al。,Blood,59,611(1977)。

 

 

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